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PcG蛋白EZH2在小鼠iPS细胞系分化过程中的作用
2012-07-10 中国科技论文在线 张艳敏 漆正宇 郭新 崔光辉 秦洁

  目的:探讨EZH2(enhancer of zeste homolog 2)在小鼠iPS细胞系IP14D-1向生殖细胞分化过程中的作用。方法:将小鼠iPS细胞系IP14D-1通过悬浮培养分化形成拟胚体(induced embryoid bodies, iEBs)作为向生殖细胞分化的启动步骤,1μM全反式维甲酸(atRA)持续诱导iEBs 2d、4d和7d后,采用实时RT-PCR、荧光定量RT-PCR、免疫荧光检测atRA处理前后EZH2和生殖细胞分化标志性基因Stra8在iEBs中的表达及定位。结果:在atRA诱导IP14D-1来源的iEBs中,EZH2表达在诱导后2d达到高峰,伴随atRA诱导,EZH2表达减弱;而生殖细胞分化标志性基因STRA8其变化特点与EZH2相反,无atRA诱导时EBs表达STRA8较弱,伴随atRA诱导,STRA8表达增强。免疫荧光显示EZH2和STRA8阳性信号分别定位于胞膜和胞浆,其变化特点与PT-PCP结果相一致。结论:atRA诱导IP14D-1早期产生抑制性的组蛋白修饰标志EZH2,EZH2和生殖细胞分化标志性基因STRA8的变化并不协调,atRA诱导可能使PGCs分化的EZH2低水平表达时期提前出现,伴随STRA8增强表达,有可能启动了iPS细胞系IP14D-1向生殖细胞的分化进程。

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